హై-పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (HPLC) ద్వారా పండ్లు మరియు కూరగాయలలో ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం పరిమాణాన్ని నిర్ధారించడం
1. ప్రయోగాత్మక సూత్రం మరియు పద్ధతి రూపకల్పన
పండ్లు మరియు కూరగాయలలో ఒక సాధారణ సేంద్రీయ ఆమ్లంగా ఉండే ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం, ఆహారం యొక్క రుచి మరియు పోషక విలువను నేరుగా ప్రభావితం చేస్తుంది. ఈ ప్రయోగంలో రివర్స్డ్-ఫేజ్ హై-పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (RP-HPLC)ని ఉపయోగిస్తారు. ఆమ్ల మొబైల్ ఫేజ్ పరిస్థితులలో, C18 క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్ను ఉపయోగించి, ఆక్సాలిక్ ఆమ్లాన్ని ఇతర అవాంతర పదార్థాల నుండి బేస్లైన్ పద్ధతిలో వేరు చేస్తారు. ఆక్సాలిక్ ఆమ్ల అణువులలోని కార్బాక్సిల్ సమూహాల యొక్క UV శోషణ లక్షణాల ఆధారంగా, పరిమాణాత్మక విశ్లేషణ కోసం 210 nm వద్ద అమర్చిన ఒక అతినీలలోహిత డిటెక్టర్ను ఉపయోగిస్తారు.
2. ప్రామాణిక వక్రరేఖ మరియు నమూనా తయారీ
ప్రామాణిక ద్రావణాలను తయారు చేయడానికి గ్రేడియంట్ డైల్యూషన్ పద్ధతిని ఉపయోగిస్తారు: 25.0 mg ఆక్సాలిక్ యాసిడ్ డైహైడ్రేట్ను ఖచ్చితంగా తూచి, 1 mg/mL స్టాక్ ద్రావణాన్ని పొందడానికి దానిని 25 mL అతిశుద్ధ జలంతో విలీనం చేయాలి. దీనిని వరుసగా 50, 100, 200, 400, మరియు 800 µg/mL వద్ద ప్రామాణిక ద్రావణాల శ్రేణిగా విలీనం చేస్తారు, ప్రతి గాఢతను మూడుసార్లు ఇంజెక్ట్ చేస్తారు.
నమూనా తయారీ కోసం, మైక్రోవేవ్-సహాయక వెలికితీతను ఉపయోగిస్తారు: 5.00 గ్రాముల పండు/కూరగాయల హోమోజెనేట్ను తూకం వేసి, 10 mL 0.1 mol/L హైడ్రోక్లోరిక్ ఆమ్ల ద్రావణాన్ని కలిపి, 60°C వద్ద మైక్రోవేవ్తో 10 నిమిషాల పాటు శుద్ధి చేసి, 0.45 µm మెంబ్రేన్ ఫిల్టర్ ద్వారా వడపోసి, పరీక్ష కోసం వడపోసిన ద్రావణాన్ని సేకరించాలి.
3. క్రోమాటోగ్రాఫిక్ పరిస్థితుల ఆప్టిమైజేషన్
మొబైల్ ఫేజ్ అనేది 0.01 మోల్/లీ పొటాషియం డైహైడ్రోజన్ ఫాస్ఫేట్ బఫర్ (pH 2.5)–ఎసిటోనైట్రైల్ (95:5) వ్యవస్థ, దీని ప్రవాహ రేటు 0.8 మి.లీ/నిమిషం మరియు కాలమ్ ఉష్ణోగ్రత 35°C. ఎసిటోనైట్రైల్ నిష్పత్తిని సర్దుబాటు చేసినప్పుడు, ఆర్గానిక్ ఫేజ్ 10% మించినప్పుడు, ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం యొక్క రిటెన్షన్ సమయం 3 నిమిషాల కంటే తక్కువకు తగ్గుతుందని, కానీ పీక్ టెయిలింగ్ సంభవిస్తుందని తేలింది. తుది ఆప్టిమైజ్ చేసిన పరిస్థితులలో, ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం యొక్క రిటెన్షన్ సమయం 4.2 నిమిషాలు, ఇది ప్రక్కనే ఉన్న సిట్రిక్ ఆమ్లం మరియు మాలిక్ ఆమ్లం నుండి పూర్తి విభజనను సాధిస్తుంది (రిజల్యూషన్ > 1.5).
4. పద్ధతి ధ్రువీకరణ
లీనియర్ రేంజ్ వెరిఫికేషన్, 10–1000 µg/mL పరిధిలో పీక్ ఏరియా మరియు గాఢత మధ్య మంచి లీనియర్ సంబంధాన్ని చూపిస్తుంది (R² = 0.9993). సిగ్నల్-టు-నాయిస్ రేషియో పద్ధతి ద్వారా నిర్ధారించబడిన డిటెక్షన్ పరిమితి (LOD), 0.5 µg/mL. రిపీటబిలిటీ పరీక్షలలో, ఒకే పాలకూర నమూనా యొక్క ఆరు పునరావృత నిర్ధారణలకు RSD 1.8%గా ఉంది. మూడు స్థాయిలలో (80%, 100%, మరియు 120%) చేసిన స్పైక్ రికవరీ ప్రయోగాలు వరుసగా 98.2%, 102.4%, మరియు 97.8% సగటు రికవరీలను అందించాయి, ఇవి పరిమాణాత్మక విశ్లేషణకు అవసరాలను తీరుస్తున్నాయి.
5. నిజమైన నమూనాల విశ్లేషణ
వాణిజ్యపరంగా లభించే ఆరు పండ్లు మరియు కూరగాయలను పరీక్షించడం జరిగింది: పాలకూర (356 ± 12 మి.గ్రా/100 గ్రా), సెలెరీ (215 ± 9 మి.గ్రా/100 గ్రా), టమాటో (18 ± 2 మి.గ్రా/100 గ్రా), ఆపిల్ (6 ± 1 మి.గ్రా/100 గ్రా), అరటిపండు (గుర్తించబడలేదు), మరియు బ్రోకలీ (89 ± 5 మి.గ్రా/100 గ్రా). జాతీయ ప్రామాణిక పద్ధతి (GB 5009.277-2016)తో పోల్చి చూసినప్పుడు, ఈ రెండు పద్ధతుల మధ్య సాపేక్ష వ్యత్యాసం 5% కంటే తక్కువగా ఉందని తేలింది, ఇది ఈ పద్ధతి యొక్క విశ్వసనీయతను ధృవీకరిస్తుంది. ముఖ్యంగా, తక్కువ పరిమాణంలో ఉన్న నమూనాలను విశ్లేషించేటప్పుడు, సాంప్రదాయ టైట్రేషన్ పద్ధతుల కంటే HPLC పద్ధతి అధిక సున్నితత్వాన్ని ప్రదర్శిస్తుంది.
6. కీలక గమనికలు
నమూనా పూర్వ-చికిత్స సమయంలో pH విలువను ఖచ్చితంగా నియంత్రించండి. సారం యొక్క pH 3 కంటే ఎక్కువగా ఉంటే, కాల్షియం ఆక్సలేట్ అవక్షేపణ తక్కువ పరీక్ష ఫలితాలకు దారితీస్తుంది. లవణ అవక్షేపణ మరియు కాలమ్ అడ్డంకిని నివారించడానికి మొబైల్ ఫేజ్ను ప్రతిరోజూ తాజాగా తయారు చేయాలి. ప్రతి 20 ఇంజెక్షన్ల తర్వాత, కాలమ్ సామర్థ్యం క్షీణించకుండా నిరోధించడానికి, కాలమ్ను అసిటోనైట్రిల్–నీరు (30:70)తో 30 నిమిషాల పాటు ఫ్లష్ చేయండి. వర్ణద్రవ్యం కలిగిన నమూనాలకు (ఉదాహరణకు, ఊదా క్యాబేజీ), ఇంజెక్షన్కు ముందు సాలిడ్-ఫేజ్ ఎక్స్ట్రాక్షన్ శుద్ధీకరణ దశను జోడించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.
7. అప్లికేషన్ మరియు విస్తరణ దిశలు
ఈ పద్ధతిని మూత్రం మరియు రక్తం వంటి జీవ నమూనాలలో ఆక్సాలిక్ ఆమ్లాన్ని గుర్తించడానికి విస్తరించవచ్చు. మొబైల్ ఫేజ్ కూర్పును సర్దుబాటు చేయడం ద్వారా (ఉదాహరణకు, టెట్రాబ్యూటిల్అమ్మోనియం హైడ్రాక్సైడ్ కలపడం), ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం మరియు దాని జీవక్రియా ఉత్పన్నాలను ఏకకాలంలో నిర్ధారించవచ్చు. మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ డిటెక్టర్తో కలిపి, మరింత కచ్చితమైన అతి తక్కువ పరిమాణంలో గుర్తించే పద్ధతిని ఏర్పాటు చేయవచ్చు. ఆహార శుద్ధి పరిశ్రమలో, ఈ పద్ధతి తక్కువ ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం ఉన్న రకాలను ఎంచుకోవడానికి మరియు వంట ప్రక్రియలను మెరుగుపరచడానికి ముఖ్యమైన సమాచార మద్దతును అందించగలదు.
జిబో అన్హావో కెమికల్ కో., లిమిటెడ్. – ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం
జిబో అన్హావో కెమికల్ కో., లిమిటెడ్. చైనాలోని షాన్డాంగ్ నుండి అధిక-నాణ్యత గల ఆక్సాలిక్ ఆమ్లాన్ని (పారిశ్రామిక గ్రేడ్, కనీసం 99.6%) సరఫరా చేసే మరియు ఎగుమతి చేసే ఒక నమ్మకమైన సంస్థ. మా ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం ఒక తెల్లటి స్ఫటికాకార ఘనపదార్థం, దీనిని ఇథేన్డయోయిక్ ఆమ్లం అని కూడా పిలుస్తారు మరియు దీని అణు ఫార్ములా C₂H₂O₄. ఇది అధిక స్వచ్ఛత, తక్కువ మలినాలు మరియు బ్యాచ్ల అంతటా స్థిరమైన నాణ్యతను కలిగి ఉంటుంది. ఇది వస్త్ర, తోలు, లోహశాస్త్రం, అరుదైన ఖనిజాల శుద్ధి, రసాయన శుభ్రత మరియు నిర్మాణ పరిశ్రమల అవసరాలను తీరుస్తుంది.
మేము నిర్జల మరియు జలజల ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం రెండింటినీ సరఫరా చేస్తాము, ఇవి 25 కిలోల సంచులు, 50 కిలోల సంచులు మరియు 1000 కిలోల బల్క్ సంచులలో లభ్యమవుతాయి. కఠినమైన నాణ్యత నియంత్రణ (QC) విధానాలు, పూర్తి పరీక్షా నివేదికలు మరియు సౌకర్యవంతమైన సరఫరా ప్రణాళికలతో, మేము ప్రపంచవ్యాప్త కొనుగోలుదారులకు స్థిరమైన డెలివరీ మరియు నిలకడైన పనితీరును అందిస్తాము. మా ఉత్పత్తులు ఆగ్నేయాసియా, యూరప్, ఆఫ్రికా మరియు అమెరికాలకు విస్తృతంగా ఎగుమతి చేయబడి, విశ్వసనీయమైన నాణ్యత మరియు పోటీ ధరలకు గుర్తింపు పొందాయి.
విశ్వసనీయమైన ఆక్సాలిక్ ఆమ్ల సరఫరా మరియు వృత్తిపరమైన సమగ్ర రసాయన సేవ కోసం జిబో అన్హావో కెమికల్ను ఎంచుకోండి.
మీ వ్యాపారానికి స్థిరమైన పనితీరును మరియు విలువను అందించే అధిక స్వచ్ఛత గల ఆక్సాలిక్ ఆమ్లం కోసం జిబో అన్హావో కెమికల్ను ఎంచుకోండి. బల్క్ ఆర్డర్లు లేదా సాంకేతిక వివరాల కోసం మమ్మల్ని సంప్రదించండి: info@anhaochemical.com
